基因检测到底是怎样的流程?你知道吗?

　　没有精准检测就没有精准医疗! 目前基因检测对临床治疗有很大的意义。

　　基因检测的意义主要有以下几个方面:1.可以了解自身是否有家族性疾病的致病基因，预测疾病的风险，像是糖尿病，心血管疾病等，往往与遗传性因素有关。2.可以用于临床上疾病的诊断，采用基因检测的方法，不仅敏感度大大提高，而且在短时间内就能得出结论。3.基因检测还可以帮助患者正确选择药物。

　　那么基因检测的实验流程到底是怎样的呢?

　　样本的采集与运输

　　受检者在医院采集血液样本或病理组织，或利用检测机构提供的样本采集装置如唾液采集盒、口腔上皮细胞采集棒等，按照要求采集样本并邮寄至检测机构。

　　病理检测

　　外科手术台切下的病理组织，我们称之为标本。首先，需要在福尔马林等“固定液”里面浸泡12小时左右。如果固定不充分，细胞会自溶，就会十分影响后续病理医师做判断。

　　病理检测就是把病变部位的组织放大，借助光学显微镜一层一层进行观察。但是病理医师想要在显微镜下透过光看清楚，只有把组织切成薄薄的一层，薄到只有一两层细胞才可以。切片厚度要做到几微米厚。假如切下的只有1cm厚的组织，全部做成切片要多少张?1cm/0.0005cm=2000张!当然，全都制成切片是十分不现实。因此，在手术台切下的一大块人体组织中，病理医师需要切下其中最有诊断价值的几小块，由病理技术员制作成切片。

　　被选中的病理组织，会放进“包埋盒”。利用这个小盒子，可以把把这块组织制作成一个“蜡块”，就像包在琥珀里面的小昆虫一样，这样才方便我们切成薄片。

　　但是，这样做出来的切片是没有颜色的，我们称之为“白片”。怎么才能在显微镜下很方便地观察组织里的细节呢?那就是染色。最常用的一种染色手段，我们称之为“HE染色”。

　　最后一步——封片，就是用封固剂把载玻片和盖玻片封固。

　　经历了这一道道繁琐的工序，我们才能拿到这一张小小的切片!

　　先别高兴，这只是万里长征的第一大步!在显微镜下做诊断其实并不容易，这需要大量知识的学习和丰富的经验积累。单纯的普通HE染色，只是把细胞染上了颜色。有时，病理医师需要特殊染色技术，用来显示细胞内外的特殊化学物质或者真菌等，比如细胞分泌的粘液、胶原等。

　　随着科技的发展，人类发明了更高级的染色方法——免疫组化染色。简单来说，免疫组化染色，就是可以把特定的细胞染上颜色。而免疫组化染色的作用，也只是提供给病理医师更多的信息，无法将疾病一锤定音。具体是什么样的诊断，仍需要病理医师综合考虑。

　　DNA质检

　　血液样本是否合格，是否可以进行测序上机，样本质量怎么样?质控不合格，只有重新采样。标准流程只需要0.1-1μg DNA，DNA的OD 260/280在1.8-2.0之间，RNA的RIN值≥8.0。实验中发现，只要RIN值大于7，就可以获得比较满意的结果。(RIN：RNA完整值)。总的来说，质控两个指标：1)足够的DNA量;2)完整的DNA基因组。这个步骤在构建文库后上机测序前完成。

　　文库构建

　　后续的文库构建。简而言之，获取足够量的/目的的/前期适合上机测序而标准处理的DNA。其程序主要有：片段化，连接，扩增。

　　上机测序

　　通过前面的步骤，我们从患者身上的一块肿瘤组织或者一管血开始，然后分离提纯我们需要的基因组DNA，再把这些DNA打成小片段，然后再在这些DNA小片段两头接上识别标记和测序接头，最后再通过基因捕获技术筛选出目的DNA，根据需求PCR扩增。通过这么多步骤，就是为上机测序做准备。一句话，上机测序的过程就是读取这些DNA小片段的序列。

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